世卫组织推荐分子线性探针法检测二线抗结核药物耐药性(SL-LPA)

屈燕 编译

背景

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●耐多药结核病（MDR-TB）是能带来很严重后果的公共健康危机和全球卫生安全危险因素。

●估计在2014年有48万人发展为耐多药结核病，其中19万人死于之。

●早期检测耐多药结核病是控制其流行的关键。2014年，估计有48万例耐多药结核病发生，但只有约1/4、即12.3万例进行了检测并报给国家主管部门。

●2016年5月，世界卫生组织新推荐了一种快速诊断方法，即线性探针法检测二线抗结核药物耐药性（SL-LPA）。

●世卫组织推荐的快速诊断方法就是要确定耐多药或耐利福平患者的二线抗结核药物耐药性，并让他们应用短程耐多药结核病治疗方案。试验结果对改善传统治疗方案也很关键。

关于此试验

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◆这种新型的试验（MTBDRsl） 是基于DNA测试来识别MDR-TB菌株基因的突变，从而获得他们耐氟喹诺酮类药物或注射二线抗结核药物的信息。

◆它是第一个也是唯一一个由世卫组织推荐在耐多药结核病和广泛耐药结核病患者中通过开展快速检测识别额外耐药性的方法，它被称为是排除是否对二线抗结核药物耐药最可靠的方法。

线性探针法检测二线抗结核药物耐药性（SL-LPA）的优势

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■SL-LPA的结果会在短短24-48小时内观察到，这比目前3个月或更长时间来说是巨大的改进。

■它能对检测出的利福平耐药或耐多药结核病患者是否纳入短程治疗方案或进行传统方案的治疗予以快速的判断和分类。

■排除二线药物的耐药性是给病人使用短程耐多药结核病治疗方案的先决条件。

■用SL-LPA法检测的任何对二线药物耐药的病人均不宜使用短程耐多药结核病治疗方案，因为会危及其治疗效果，并有发展为广泛耐药的可能。

■用SL-LPA法检测的任何广泛耐药结核病人也不能使用短程耐多药结核病治疗方案，他们需要精心设计个体化治疗方案，以优化其治疗成功的机会。

费用

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▲FIND已经与138个国家签署合同按每例7.50欧元（约10美元）的价格（http://www.finddx.org/pricing/），这种测试还需要其他实验室耗材和可耗成本，合计起来是每例20到30美元之间。

▲设备的成本约在8,000到40,000美元之间，取决于设备的大小以及结果是否自动读取。

世界卫生组织推荐使用线性探针法检测二线抗结核药物耐药性（SL-LPA）

  http://www.who.int/tb/areas-of-work/laboratory/policy_statements 

政策推荐

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世卫组织建议使用SL-LPA法对确诊的利福平耐药或耐多药患者进行初测以判别其是否对氟喹诺酮类药物和二线注射药物耐药，而不是基于表型培养的药敏试验（DST）。

条件

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★推荐SL-LPA法使用于无论经痰标本直接测试、或间接培养而确诊的耐利福平或耐多药结核病患者，其中包括成人和儿童（无关涂片状态）。

★对于二线注射药物耐药性的检测结果，SL-LPA法检测和传统培养结果均具有很大的相关性。

★对于氟喹诺酮类，在氧氟沙星和左氧氟沙星与莫西沙星的比较中，前两者用SL-LPA法检测比传统培养具有更强的耐药相关性，莫西沙星在利福平耐药或耐多药结核病的治疗方案中是经过表型检测最好的治疗指南。

★建议并不排除需要用表型的DST试验确定在治疗期间对其他药物的耐药性。

在国家层面建立线性探针法检测二线抗结核药物耐药性（SL-LPA）

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▼国家现有的LPA能力能够立即开展SL-LPA检测，因为这和一线的LPA实验方法一样。

▼LPA适合于国家/ 中心参比实验室或有成熟的能力进行分子检测的地区。 扩充分散的实验室要考虑其基础设施、人员受训和充分的质量保证。

▼必须要有足够、适当和可用的实验室基础设施和设备，包括必要的生物安全防范措施来预防污染：标本处理需要有结核病实验室和适当的生物安全柜。 LPA的实验室需要至少3个独立房间，用于DNA提取、预扩增处理和扩增及扩增后的处理。 禁止分子设施进入，单向工作流程，严格清洗以避免污染。

▼实验室工作人员要进行培训以具备开展LPA能力。强烈推荐通过资深工作人员的监督和提供足够的培训提升分子检测经验。实验室的外部质量控制评估应放在首位。建立快速提供LPA结果报告给临床医生的工作机制，将有助于为患者提供早期诊断。

▼按照给世界卫生组织的报告，2014年低收入和中等收入国家大约建立了约400 家LPA实验室。

（原文链接：http://www.who.int/tb/Factsheet_SLLPAfinal.pdf?ua=1）

（译者单位：中国疾病预防控制中心结核病预防控制中心）